Floresan mikroskobu için numune ışık yayar. Peki ya? Numuneye boya molekülleri ekleyerek. Boya molekülü tipik olarak ışık enerjisini emdiğinde heyecanlanır, böylece yakalanan enerjiyi ışık olarak serbest bırakır. Uyarılmış bir molekül tarafından salınan ışık enerjisi, yaydığı ışıktan daha uzun bir dalga boyuna sahiptir. Boya molekülleri tipik olarak belirli bir ışık dalga boyuna maruz kaldığında floresans veren floresan boyalardır. Oluşturulan görüntü, ışık yayan bir floresan boya etiketinden alınmıştır.
Bu çalışma mekanizmasının ardındaki prensip, bir floresan mikroskobunun bir numuneyi ultraviyole veya ultraviyole ışığa veya mavi ışığa maruz bırakması ve böylece floresans tarafından yayılan numunenin bir görüntüsünü oluşturmasıdır. Bir uyarma filtresinden geçen yoğun bir ışık huzmesi üreten bir cıva buharlı ark lambasına sahiptirler. Uyarma filtresinin işlevi, belirli dalga boylarını floresan boya ile lekelenmiş numune üzerine iletmek, böylece floresan boya etiketinin bir görüntüsünü oluşturmaktır.
Objektif merceğinden sonra, asıl amacı gözlemcinin ışığına zararlı olabilecek her türlü UV radyasyonunu ortadan kaldırarak görüntünün kontrastını azaltmak olan bir bariyer filtresi bulunmaktadır.
UygulamalarıFloresan mikroskobu
Mycobacterium tuberculosis gibi bakteriyel ajanların görselleştirilmesi için.
Antikorları floresan boyalarla etiketleyerek bakteriyel antijenlere/patojenlere karşı üretilen spesifik antikorları tanımlamak için immünofloresan tekniklerinde kullanılır.
Floresan boyalarla etiketlenmiş mikroorganizmaları tanımlamak ve gözlemlemek için ekolojik araştırmalarda kullanılır
Ayrıca özel bir boyayla işlendiğinde yaydıkları renk sayesinde ölü ve canlı bakterileri ayırt edebiliyor.
Yukarıda tartışılan mikroskoplara ek olarak, diferansiyel girişim kontrast mikroskobu adı verilen daha az kullanılan bir mikroskop da vardır. Görüntünün, saptırılan veya saptırılmayan ışık ışınları tarafından oluşturulduğu faz kontrast mikroskobuna çok benzer. Aradaki fark, burada iki ışık huzmesinin numune üzerine gönderilmesi ve bir prizma tarafından odaklanmasıdır. Bir ışın numuneye ulaşmak için prizmadan geçerken, diğer ışın numunenin olmadığı slaytın şeffaf bir alanından geçer. Daha sonra iki ışın birleşerek birbirine müdahale ederek bir görüntü oluşturur. Endosporlar, bakteriyel hücre duvarları, çekirdekler ve granüller gibi boyanmamış numunelerin hücresel yapılarını görüntülemek için kullanılabilir.
